多功能酶標儀是實驗室中常用的精密檢測儀器,憑借其能同時檢測多種信號的特點,廣泛應用于生命科學、醫(yī)學研究、藥物開發(fā)、環(huán)境監(jiān)測等多個領域。以下是其常見用途的詳細介紹:
一、常規(guī)光吸收檢測(比色法)
這是酶標儀最基礎的功能,通過檢測樣品對特定波長光的吸收值來分析物質濃度或反應情況。
生化指標檢測:如檢測血清或細胞培養(yǎng)液中的葡萄糖、膽固醇、尿素氮、轉氨酶等含量,常用于臨床診斷或動物實驗中的生理指標分析。
微生物生長監(jiān)測:通過測定不同時間點細菌或真菌培養(yǎng)液在 600nm 左右波長的吸光度,繪制生長曲線,了解微生物的生長速率和生長階段。
二、熒光檢測
利用熒光物質被激發(fā)光照射后發(fā)出的熒光強度進行定量分析,靈敏度遠高于比色法,適用于微量物質檢測。
熒光探針檢測:例如使用鈣熒光探針(如 Fura-2)檢測細胞內鈣離子濃度變化,研究細胞信號傳導;或通過熒光標記的抗體檢測特定蛋白質的表達量(熒光免疫分析)。
核酸定量與定性:使用 SYBR Green 等熒光染料嵌入 DNA 雙鏈,通過熒光強度定量核酸濃度;也可用于實時熒光定量 PCR(qPCR)的終點檢測或 melting curve 分析(部分酶標儀支持)。
細胞活性與凋亡檢測:如采用 Hoechst 染色檢測細胞核形態(tài)變化(凋亡特征),或使用熒光素酶報告基因系統(tǒng)分析基因表達調控。
三、化學發(fā)光與生物發(fā)光檢測
基于化學反應或生物反應產生的光信號進行檢測,靈敏度非常高,適合超微量物質分析。
化學發(fā)光免疫分析:如檢測激素(如甲狀腺激素、性激素)、腫瘤標志物(如 CEA、AFP)等,通過抗原 - 抗體反應結合化學發(fā)光底物(如魯米諾)產生的光信號定量分析。
生物發(fā)光檢測:利用螢火蟲熒光素酶、海腎熒光素酶等報告基因,監(jiān)測基因啟動子活性、細胞信號通路激活情況,或用于活體成像前的體外預實驗。
四、細胞水平分析
多功能酶標儀常搭配細胞培養(yǎng)板(如 96 孔板、384 孔板),用于高通量細胞功能檢測。
細胞增殖與毒性檢測:如通過 CCK-8 法、MTT 法檢測細胞存活率(增殖)或藥物對細胞的毒性(抑制率),廣泛應用于藥物篩選。
細胞凋亡與壞死檢測:使用 Annexin V - 熒光染料(如 FITC)結合 PI 染色,通過熒光信號區(qū)分凋亡早期、晚期及壞死細胞。
細胞內氧化應激檢測:如利用 DCFH-DA 探針檢測細胞內活性氧(ROS)水平,評估環(huán)境因素或藥物對細胞的氧化損傷。
五、其他特殊檢測
時間分辨熒光(TRF)檢測:通過延遲檢測時間消除背景熒光干擾,常用于稀土元素標記的免疫分析(如鑭系元素螯合物),提高檢測特異性。
熒光偏振(FP)檢測:基于熒光分子轉動速度的變化,分析分子間相互作用(如蛋白質 - 小分子結合、DNA - 蛋白質結合),適用于藥物篩選中的靶點結合實驗。
AlphaScreen( Amplified Luminescent Proximity Homogeneous Assay ):一種均相檢測技術,通過微珠 proximity 效應產生化學發(fā)光,用于檢測蛋白質 - 蛋白質、蛋白質 - 核酸等相互作用,無需洗滌步驟,適合高通量篩選。
總結
多功能酶標儀的核心優(yōu)勢在于高通量、多模式檢測,能滿足從分子水平(核酸、蛋白質)到細胞水平的多種實驗需求,是現(xiàn)代實驗室中藥物研發(fā)、基礎科研、臨床診斷等領域重要的工具。不同型號的酶標儀在檢測模式、靈敏度、通量上可能存在差異,需根據(jù)具體實驗需求選擇。